光譜分析中，常用到比色皿進(jìn)行定量和定性分析。一旦比色皿選擇、使用、清洗不當(dāng)，便可能造成實(shí)驗(yàn)誤差等不良后果。
比色皿分類
比色皿，又名吸收池、樣品池，用于盛放參比液、樣品液。配套在光譜分析儀器上，如分光光度計(jì)，血線
蛋白分析儀，粒度分析儀等。
比色皿按使用的波長范圍可分為三大系列：可見光系列（稱：玻璃比色皿）；紫外可見光系列（稱：石英比色皿）；紅外光系列（稱：紅外比色皿）。
比色皿選擇
玻璃比色皿只能用于可見光區(qū)，適用于330～1000nm 波長范圍。
石英比色皿既適用于紫外光區(qū)，也可用于可見光區(qū)，適用于200～400nm波長范圍。
由于玻璃比色皿的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于石英比色皿，通常選擇可見光區(qū)使用玻璃比色皿，紫外光區(qū)使用石英比色皿。
比色皿使用
在使用比色皿時(shí),兩個(gè)透光面要完-全平行,并垂直置于比色皿架中,以保-證在測(cè)量時(shí),入射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保-證光程固定。
比色皿一般為長方體，其底及兩側(cè)為磨毛玻璃，另兩面為光學(xué)玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫?zé)Y(jié)和膠粘合而成。所以使用時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：
◇ 拿取比色皿時(shí)，只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃，避免接觸光學(xué)面，用力不可過大。同時(shí)注意輕拿輕放，防止破損。
◇ 比色皿中不應(yīng)長-期盛放含有腐蝕玻璃物質(zhì)的溶液。
◇ 比色皿高溫后易爆裂，因此不應(yīng)放在火焰或電爐上加熱或干燥箱內(nèi)烘烤。
◇ 比色皿的透光面不應(yīng)與硬物或臟物接觸。比色皿使用時(shí)請(qǐng)勿碰撞。
◇ 盛裝溶液時(shí)，高度應(yīng)為比色皿的2 /3 處，光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附，然后再用鏡頭紙或絲綢順著同一方向擦拭。
◇ 在測(cè)量時(shí)如對(duì)比色皿有懷疑，可自行檢測(cè)。可將波長選擇在實(shí)際使用的波長上，將一套比色皿都注入蒸餾水，將其中一只的透射比調(diào)至95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)處，測(cè)量其它各只的透射比，凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。
比色皿誤差規(guī)避
①比色皿的透光面不應(yīng)與硬物或臟物接觸，比色皿使用時(shí)勿碰撞。
②比色皿中的液體，應(yīng)沿毛面傾斜，慢慢倒掉，不要將比色皿翻轉(zhuǎn)，直接口向下放在干凈的濾紙上吸干剩余液，然后用蒸餾水沖洗比色皿內(nèi)部倒掉(操作同上)避免液體外流，使第2次測(cè)量時(shí)不用擦拭比色皿，不致因擦拭帶來的誤差。
③比色將各個(gè)比色皿中裝入蒸餾水，在比色波長下進(jìn)行比較，誤差在±0.001吸光度以內(nèi)的比色皿選出4-8個(gè)進(jìn)行比色測(cè)定，可避免因比色皿差異造成測(cè)量誤差。
④用完即清洗，清洗后在通風(fēng)陰涼處干燥，等徹-底干燥后放入相應(yīng)裝具中。放置時(shí)，裝具保持清潔干燥，比色皿應(yīng)秉承“光面朝上，毛面在兩側(cè)”的原則，這樣便于抓取兩毛面拿出使用，不易弄污光面。
比色皿清洗
分光光度法中比色皿潔凈與否是影響測(cè)定準(zhǔn)確度的因素。因此，比色皿必須保持清潔和無傷痕，選擇正確的洗凈方法。
清洗液
比色皿清洗液：
濃鹽酸：甲醇：水=1：4：3
如果比色皿被有機(jī)物污染，宜用鹽酸—乙醇(1：2)混合液浸洗，也可用相應(yīng)的有機(jī)溶劑如醇醚混合物浸泡洗滌。如：油脂污染可用石油醚浸洗，鉻天青顯色劑污染可用硝酸(1：2)浸洗等。
也可用冷的或溫?zé)岬?40~50℃)陰離子表面活性劑的碳酸鈉溶液(2%)浸泡，可加熱10分鐘左右。對(duì)于有色物質(zhì)的污染可用HCL(3mol/L)-乙醇(1+1)溶液洗滌。
有色物質(zhì)污染的比色皿用鹽酸:乙醇(1:2)浸泡一段時(shí)間，顏色就去掉了。
清洗步驟
① 比色皿用完后應(yīng)當(dāng)先用適當(dāng)溶劑沖洗，注意里外都要洗到。如果溶劑無毒的話，可以裝入一半溶劑后，用手指按住比色皿的兩端，用力搖晃，次數(shù)應(yīng)當(dāng)是不少于三次。
② 然后用大量的自來水沖洗，這一步對(duì)水溶液和鹽溶液非常重要。當(dāng)然如果所用溶劑不親水這步可以放棄。
③ -后再用去離子水清洗，注意里外都要洗到，如果溶劑不親水的這一步也可放棄。
④ 洗完后不要刻意的將比色皿擦干，需放在比色皿盒內(nèi)，不用蓋上讓其自然揮干。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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