1 真菌毒素標準的發(fā)展
真菌毒素是產毒真菌在糧食（或果蔬）的種植、收獲、運輸、儲存過程中侵染糧食（或果蔬），并在適宜的生長條件下產生的次生代謝產物。真菌毒素污染谷物、飼料、果蔬，通過食物鏈危害人類健康和畜禽生產安全。因此，衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）和聯(lián)合國糧農組織（Food ａnd Agriculture Organization，F(xiàn)AO）把真菌毒素列為食源性疾病的三大根源之shou。我國是真菌毒素污染嚴重的國家。
目，人們發(fā)現(xiàn)的真菌毒素有400多種。我國重點關注黃曲霉毒素（主要是Aflatoxin B1，AFB1和Aflatoxin M1，AFM1）、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）、玉米赤霉烯酮（Zearale，ZEN）、赭曲霉毒素（Ochratoxin A，OTA）、展青毒素（Patulin，Pat）、T-2毒素（T-2 toxin，T2）和伏馬毒素（Fumonisins，F(xiàn)Bs）等，這些毒素具有強毒性和高污染頻率等特點，每種毒素的化學結構、生物毒性及適宜生長的基質不同；有些毒素會在飼用動物體內發(fā)生結構轉化，以結構類似物存在動物源性食品中，危害人類健康。包括我國在內的許多國家都制定了真菌毒素的限量標準，這些限量標準是非關稅壁壘的重要組成部分，也是保障我國食品安全和畜牧業(yè)健康發(fā)展的需要。
黃曲霉毒素M1結構式
從“十五”到“十二五”，國家重點關注農、獸藥等外源性有毒有害物質污染，對真菌毒素的重視較晚，相關檢測技術的研究起步也晚。國家標準委員會曾提出在標準制定中采用標準和國外先-進技術、積與接軌的要求，促使我國真菌毒素檢測標準的制修訂得到了充分的發(fā)展。一些標準制定借鑒了國外先-進的檢測技術，這在一定程度上為我國國有品牌樹立了biao桿和發(fā)展方向。
經過十多年的發(fā)展，我國制定了一系列的真菌毒素相關標準，但還需要在檢測技術、作用毒理、公共危害等域得到加強的基礎上逐步改進和豐富。研究人員曾對我國真菌毒素的檢測標準進行探討，但那些被討論過的標準很多已被廢止，側面反映了近些年來我國真菌毒素標準制定的活躍和國家的重視。
真菌毒素標準包括限量標準和檢測標準。按照檢測方法，可分為大型
儀器方法和快速檢測方法；按照適用范圍，可分為食品類、原糧類和飼料類。本文對我國現(xiàn)行真菌毒素檢測標準進行了梳理、闡述和分析，根據筆者對真菌毒素檢測技術的了解，對各類標準涉及的技術進行思考和探討，并從應用和市場角度提出了一些建議和意見，希望能為我國真菌毒素標準的發(fā)展提供有益的參考。
2 我國現(xiàn)行的食品中真菌毒素的標準
現(xiàn)行的食品安全國家限量標準GB 2761-2017《食品中真菌毒素限量》，屬國家強制執(zhí)行的標準。GB 2761包括限定的毒素種類、限量、食品類型及檢驗方法的標準。早的GB 2761是1981年頒布實施的，先后經過四次修訂。1981年版只規(guī)定了AFB1的限量和食品種類；2005年版增加了AFM1、DON、Pat；2011版又增加了OTA、ZEN。2017版沒有增加毒素種類，但對食品類型的劃分更加細致。該標準沒有做出受飼料行業(yè)監(jiān)管、污染原糧的FBs、T-2的限定。GB 2761的修訂，反映了國家對食品真菌毒素污染的重視。下邊將對每種真菌毒素的現(xiàn)行檢測標準逐一闡述和分析：
2.1 黃曲霉毒素（AF）
AF是產毒真菌黃曲霉和寄生曲霉產生的次代謝產物，是毒性強的化學致癌物質。目分離鑒定出的AF包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2等18種。1993年癌癥研究所將AF確定為一人類致癌物。熱帶和亞熱帶地區(qū)農作物易遭受AF污染，居民肝癌發(fā)病率較高。
GB 276l-2017規(guī)定了食品中AFB1/M1的-大限量標準及其存在的食品類別：谷物及其制品、豆類及其制品、堅果及籽類、油脂及其制品、調味品、特殊膳食用食品等6大類18小類，限量范圍為0.5~20 μg/kg，其中特殊膳食用食品的限量di。AFM1限量的食品類別分為乳及乳制品、特殊膳食用食品等2大類8小類，統(tǒng)一限量0.5 μg/kg。GB 276l-2017的限量明顯比GB 13078-2017《飼料衛(wèi)生標準》嚴格，但低于歐盟食品的限量要求。
AF的檢測標準(見表1)包括國家標準(GB)、糧油行業(yè)標準(LS)、農業(yè)行業(yè)標準(NY)、出入境檢驗檢疫行業(yè)標準(SN)、地方標準(DB)及食藥局快檢標準(KJ)等，涵蓋了真菌毒素檢測的所有方法。涉及的檢測方法有柱后光化學衍生高-效液相色譜法、超高-效液相色譜法、免疫親和柱凈化-高-效液相色譜法、同位素內標-液相色譜-串聯(lián)質譜法、高-效液相色譜-柱衍生法等儀器分析方法和膠體金定量/定性檢測技術、酶聯(lián)免疫吸附篩查法、時間分辯熒光定量檢測技術、雙流向酶聯(lián)免疫法、薄層色譜法、免疫親和層析凈化熒光光度法等快檢方法。
一種作物可能被多種真菌毒素污染，因此對多種真菌毒素同時檢測的技術很有實際應用價值。剛剛實施的LS/T 6133-2018《主要谷物中16種真菌毒素的測定 液相色譜串聯(lián)質譜法》采用穩(wěn)定同位素內標液相色譜-串聯(lián)質譜法，對谷物中多種毒素同時檢測，該技術除了檢測我國日常監(jiān)管的毒素外，還可以檢測其衍生物或結構類似物。
快檢方法不僅僅是對實驗室方法的有益補充，根據2015年頒布的《食品安全法》，國家認-可的快檢方法可以作為執(zhí)-法依據。農業(yè)部、國家糧食局和國家食藥總局先后頒布了8個免疫檢測技術的標準。糧食行業(yè)標準率-先將膠體金定量檢測技術納入標準中，之膠體金免疫層析技術只是作為定性篩查的手段。2017年國家食藥局頒布了三個真菌毒素快檢標準，其中兩個是AF的標準。這些都為免疫層析技術在農業(yè)、糧油、食藥行業(yè)的應用提供了技術保障和標準支撐，同時也有效保障了這些域AF的監(jiān)管和檢測。唯1寫入GB或GB/T的免疫方法是市場應用劇減的酶聯(lián)免疫，目應用廣泛的免疫層析技術只出現(xiàn)在行業(yè)標準中。
全球有100多個國家和地區(qū)制訂了食品和飼料中AF限量標準。我國對食品中AFB1和AFM1的-高允許量有嚴格規(guī)定，而美國、加-拿-大等國家主要對AF總量（B1+B2+G1+G2）做出限定。為了滿足進出口的需求，SN標準是針對黃曲霉毒素總量的檢測。
黃曲霉毒素的檢測標準覆蓋了AF污染的大多數食品，2020年《中國藥典》2351真菌毒素測定法，更是增加了藥材、飲片及中藥制劑中真菌毒素的檢測。但是，一些過時檢測技術的行業(yè)標準依然有效：如NY/T 1664-2008《牛乳中黃曲霉毒素的快速檢測 雙流向酶聯(lián)免疫法》，該技術操作繁瑣，業(yè)性要求高，且只能定性檢測，市面上已很難買到相應的檢測試劑。薄層色譜法是一種處理復雜、當應用很少的檢測技術，依然作為第五法寫入GB 5009.22-2016中。編者建議廢止不能適應市場需要的一些標準。
2.2 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇又稱為嘔吐毒素，廣泛存在玉米、小麥、大麥等谷物中，是污染食物的主要真菌毒素。DON破壞人和動物免疫系統(tǒng)，具有一定的胚胎毒性和致畸性。各國都對食品中DON做出了限量要求。GB 276l-2017規(guī)定谷物及其制品中DON的限量是1000 μg/kg，與美國對小麥的限量標準一致。而歐盟標準規(guī)定的非常細致：未加工的硬質小麥、谷物和玉米中DON的限量為1750 μg/kg，未加工的谷物（除述之外的谷物）的DON限量是1250 μg/kg，終端銷售的谷物面粉、麩皮和胚芽的DON限量為750 μg/kg，谷物為原料的嬰兒食品中DON限量不得超過200 μg/kg；日本規(guī)定小麥和小麥制品的DON限定量為1100 μg/kg。
DON的檢測標準有9個(見表2)，包括4個LS，1個KJ，3個GB和1個SN，其中GB 5009.111-2016《食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙�；苌锏臏y定》是GB 2761-2017zhi定的檢驗方法，可以檢測谷物及其制品、酒類、醬油、醋中的DON及其乙酰化衍生物。與AF相比，DON檢測標準的數量和方法明顯減少，但DON作為糧食行業(yè)重點關注的毒素，LS占比非常大。DON的結構類似物雪腐鐮刀菌烯醇(NIV)對我國中東部作物的污染較常見，但目只有DB32/T 3205-2017《飼料中雪腐鐮刀菌烯醇(NIV)的測定 免疫親和柱凈化-高-效液相色譜法》提出了它的檢測方法。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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