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技術(shù)文獻(xiàn)

遠(yuǎn)慕生物:微生物實(shí)驗(yàn)室日常工作規(guī)范!
閱讀次數(shù):1793 發(fā)布時(shí)間:2021/8/3 11:05:31
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為了規(guī)范微生物的日常工作,達(dá)到日常工作實(shí)事求是、及時(shí)準(zhǔn)確、優(yōu)-質(zhì)服務(wù)、質(zhì)量至上的目標(biāo),保-證日常工作的順利進(jìn)行,做如下規(guī)定:
一、微生物檢測(cè)意識(shí)
樹立正確的無(wú)菌觀念和檢測(cè)人員的素質(zhì),是每一個(gè)微生物檢測(cè)人員應(yīng)具備的素質(zhì),好的修養(yǎng)素質(zhì)和積的工作態(tài)度是保-證結(jié)果準(zhǔn)確的基礎(chǔ),下面的規(guī)定規(guī)范都是為檢測(cè)服務(wù)的,如果檢測(cè)人員沒有好的素質(zhì),這些規(guī)定都是虛設(shè),擺設(shè);希望下面的規(guī)范是每位檢測(cè)人員想要做得,而不是強(qiáng)加在自己身上的緊箍zhou。
①增強(qiáng)自己得生物安全意識(shí),如何保護(hù)自己,如何保護(hù)樣品,如何無(wú)菌操作,有責(zé)任心。
②實(shí)驗(yàn)原理,實(shí)驗(yàn)原理是實(shí)驗(yàn)的精髓,掌握它,就能夠?qū)φ麄(gè)實(shí)驗(yàn)更好的了解深入,學(xué)習(xí)研究。
③實(shí)驗(yàn)條件的把握,對(duì)實(shí)驗(yàn)的每個(gè)條件是否掌握清楚,實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵控制點(diǎn)是否清楚。
④實(shí)驗(yàn)結(jié)果的把握,一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn),先應(yīng)該自我分析,并且具備這種分析能力,對(duì)異常如何處理或是進(jìn)一步驗(yàn)證。
⑤具備研究好學(xué)心態(tài),檢測(cè)工作是一個(gè)相對(duì)只是含量較高的職業(yè),高科技飛速發(fā)展的-天,許多當(dāng)時(shí)的先-進(jìn)技術(shù)不久就陳舊落后,檢測(cè)工作也一樣,優(yōu)-秀的化驗(yàn)員總是虛心好學(xué),善于研究,總是處在科技的沿。
⑥人員素質(zhì),積向上,樂(lè)于助人,對(duì)工作負(fù)責(zé),工作第1等,努力提高自己的工作質(zhì)量。


二、微生物檢測(cè)
1.實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備
1.1無(wú)菌間
無(wú)菌間是微生物實(shí)驗(yàn)的重要環(huán)節(jié),關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,無(wú)菌間的使用規(guī)范要嚴(yán)格要求,保-證實(shí)驗(yàn)環(huán)境影響因素降到蕞低。
使用要求:
1、無(wú)菌間在使用,必須先-進(jìn)行清理、臭氧殺菌時(shí)間50min或紫外燈殺菌30min。
2、檢測(cè)使用的器皿、樣品等物品的進(jìn)出,通過(guò)緩沖窗進(jìn)行傳遞,使用完畢后紫外燈殺菌30min,開傳遞窗時(shí)禁止兩邊同時(shí)打開。
3、檢測(cè)人員進(jìn)入緩沖間后,先更換拖鞋、佩帶無(wú)菌帽和一次性kou罩,更換衣服,并將其擺放整齊,方可進(jìn)入無(wú)菌間。
4、進(jìn)入無(wú)菌室過(guò)程中,依次打開和關(guān)閉各緩沖間的門,以避免空氣流通帶入外界的雜菌。
5、無(wú)菌操作必須使用75%酒精對(duì)手部進(jìn)行消du,接種有害菌種時(shí)必須戴手套。
6、進(jìn)行接種所用的吸管,平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)嚴(yán)格消du滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼后使用,剪刀、鑷子至少每周進(jìn)行一次高壓滅菌。
7、從包裝中取出吸管時(shí),吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時(shí),吸管尖不得觸及試管或平皿邊。
8、接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈操作,接種細(xì)菌或樣品時(shí),吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過(guò)火焰消du。
9、接種環(huán)或針在接種細(xì)菌應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必要時(shí)還要燒到環(huán)和針與桿的連接處,接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min,再經(jīng)火焰燒灼。
10、吸管吸取菌液或樣品時(shí),應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。
11、檢驗(yàn)結(jié)束后,所有帶菌的培養(yǎng)基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快清理出無(wú)菌間滅菌洗刷。
12、檢驗(yàn)結(jié)束后,人員離開無(wú)菌間,須將無(wú)菌間的衛(wèi)生徹-底清理、并用紫外燈進(jìn)行殺菌。
13、無(wú)菌間所用工器具(剪刀、鑷子、膠頭、涂抹棒、托盤盒等)使用完畢后,擺放整齊。
14、滅菌后的無(wú)菌間懸掛“已滅菌”標(biāo)識(shí),正在使用的無(wú)菌間要懸掛“使用中”標(biāo)識(shí)。防止檢測(cè)人員在未經(jīng)過(guò)滅菌的無(wú)菌間中進(jìn)行微生物檢測(cè)。


其它注意事項(xiàng):
1.  禁止在無(wú)菌間內(nèi)打手機(jī),由于業(yè)務(wù)需要可在緩沖間內(nèi)打手機(jī)。
2.  實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿著整齊,不要出現(xiàn)露頭發(fā)、鼻孔等現(xiàn)象,禁止在無(wú)菌間打鬧、喧嘩。
3.  實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,物品要擺放整齊,實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的垃圾要單獨(dú)存放不要亂放,防止污染實(shí)驗(yàn)樣品。
4.  紫外燈每周五打掃衛(wèi)生時(shí)要用酒精棉球擦拭,防止灰塵阻擋影響殺菌效果。

1.2實(shí)驗(yàn)器具
實(shí)驗(yàn)器具是微生物實(shí)驗(yàn)的一個(gè)關(guān)鍵控制點(diǎn),實(shí)驗(yàn)器具的無(wú)菌是保-證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的重要因素。
①培養(yǎng)皿,先應(yīng)確認(rèn)是否經(jīng)過(guò)消du,確認(rèn)后進(jìn)行外觀檢查,觀察是否有破損,有破損處廢棄。滅過(guò)菌的平皿多保存一周時(shí)間。打開的平皿整齊的擺放到實(shí)驗(yàn)臺(tái)上備用,發(fā)現(xiàn)有破裂的平皿應(yīng)廢棄;使用時(shí)看是否有平皿內(nèi)部存有雜質(zhì)、培養(yǎng)基等異物也應(yīng)立即廢棄。
②玻璃器皿,新購(gòu)置玻璃器具因含有游離堿,應(yīng)在清潔液或2%鹽酸內(nèi)浸泡24小時(shí),再用蒸餾水清洗。檢驗(yàn)沾染的油跡、污濁物等器具可用10%NaOH浸泡1小時(shí)后,用清水沖洗干凈。每周洗刷盛生理鹽水的三角瓶子,防止水垢太厚影響滅菌和微生物生長(zhǎng)。
③實(shí)驗(yàn)完畢后,使用的實(shí)驗(yàn)器具應(yīng)立即清洗消du,防止微生物增長(zhǎng)污染或者傷害到人員。所有衛(wèi)生用具如拖把、掃帚、抹布、垃圾桶等都要根據(jù)污染區(qū)、清潔區(qū)、無(wú)菌區(qū)要求嚴(yán)格區(qū)分開、并用,不得相互混淆,衛(wèi)生用具每周定量用1:20次氯酸鈉液消du浸泡、清洗、涼干,以免污染。
④在進(jìn)行各種檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)避免污染;遇有場(chǎng)地、工作服等污染時(shí),應(yīng)立即處理,防止細(xì)菌擴(kuò)散以免造成污染。凡吸過(guò)菌液的吸管或滴管或染菌的培養(yǎng)皿,應(yīng)立即放入盛有消du液的容器內(nèi)或高壓滅菌處理。工作人員必須每天堅(jiān)持做好環(huán)境衛(wèi)生工作,防止灰塵飛揚(yáng),定期對(duì)整個(gè)操作環(huán)境進(jìn)行消du。

1.3藥品的使用
微生物藥品是微生物實(shí)驗(yàn)的一個(gè)關(guān)鍵控制點(diǎn),培養(yǎng)基質(zhì)量的關(guān)系到檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的重要因素。
①藥品的采購(gòu),實(shí)驗(yàn)藥品缺少時(shí),由藥品管理員上計(jì)劃。微生物藥品常規(guī)藥品按“箱”進(jìn)行計(jì)算,不常用藥品按“瓶”進(jìn)行計(jì)算,生化鑒定管按“支”進(jìn)行計(jì)算,每種保留至少1個(gè)單位庫(kù)存量。
②藥品取用,藥品取用時(shí)到藥品管理員取鑰匙,取用后將藥品柜鎖死,并將鑰匙歸還給藥品管理員。取用人員發(fā)現(xiàn)藥品低于1個(gè)單位庫(kù)量時(shí),及時(shí)通知藥品管理員。
③將近過(guò)期藥品(2個(gè)月),生化鑒定管可以退貨,其他藥品抓緊時(shí)間使用,過(guò)期藥品廢除。
④新藥品使用時(shí),應(yīng)注意檢查包裝是否有破損?粉末狀藥品是否有結(jié)塊?有無(wú)雜質(zhì)?有無(wú)變色等異常。
⑤藥品稱量按照使用要求配制,并填寫藥品配制記錄。
⑥配制好的藥品按照滅菌要求進(jìn)行,含糖的培養(yǎng)基滅菌總時(shí)間不超過(guò)45min,滅菌后觀察培養(yǎng)基的顏色、容量等,并搖勻培養(yǎng)基,放置瓊脂沉淀到底部。
⑦培養(yǎng)基使用,按要求進(jìn)行溶解,在溶解過(guò)程中要防止二次污染和溶解不充分;溶解后放到45~50度,放置備用時(shí)間不超過(guò)4h。
⑧使用時(shí),進(jìn)行冷卻溫度控制到45度左右,過(guò)高容易殺死微生物,過(guò)低培養(yǎng)基凝固。
⑨傾倒培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,并搖勻培養(yǎng)基。傾倒過(guò)多,培養(yǎng)基過(guò)厚需氧環(huán)境不好,過(guò)薄培養(yǎng)基容易干裂影響檢測(cè)結(jié)果,配制培養(yǎng)基盡可能按照樣品量進(jìn)行配制,使用后的培養(yǎng)基根據(jù)情況廢棄或保存。

1.4滅菌鍋的使用
滅菌鍋屬于高壓滅菌容器,安全性和滅菌效果是控制的重點(diǎn),使用規(guī)范如下:
安全事項(xiàng):由于滅菌鍋屬高壓容器,壓力表要及時(shí)計(jì)量,操作過(guò)程中人員不得離開現(xiàn)場(chǎng),如有異常問(wèn)題及時(shí)通知相關(guān)人員,機(jī)修,管道。
①檢查高壓滅菌鍋的外觀是否正常,壓力表、溫度計(jì)是否歸零,各管路閥門是否為關(guān)閉狀態(tài)。
②排放物品,注意不要過(guò)滿;關(guān)鍋并將標(biāo)示牌轉(zhuǎn)到已滅菌,調(diào)節(jié)閥打到排氣狀態(tài)。
③打開總閥門,打開排水法,進(jìn)行管道排水,約1-2min當(dāng)聽到無(wú)水聲時(shí),關(guān)閉排水法。
④打開進(jìn)氣閥和出氣閥,進(jìn)行排氣,此過(guò)程是對(duì)鍋內(nèi)空氣進(jìn)行排氣,防止空氣存在影響滅菌效果。
⑤排氣等夾層壓力達(dá)到0.5Mpa,將調(diào)節(jié)閥調(diào)到滅菌狀態(tài)進(jìn)行滅菌,培養(yǎng)基121℃15min;其他特殊培養(yǎng)基安滅菌要求進(jìn)行滅菌。注意事項(xiàng)由于溫度為手控,所以滅菌過(guò)程中要注意溫度的變化。
⑥滅菌完畢后,填寫滅菌記錄,并關(guān)閉進(jìn)氣閥,排氣閥不用關(guān)閉,并等溫度降低60度左右,壓力降到0;如果壓力過(guò)大時(shí)開鍋有可能打不開,另一個(gè)容易造成液體倒吸使瓶塞蹦出。
⑦開鍋后,及時(shí)將培養(yǎng)基取出搖勻后冷卻,物品取出后負(fù)責(zé)人要及時(shí)清鍋,防止其他物品污染滅菌物品。
⑧滅菌結(jié)束后,將排水閥打開,防止管道積水。


其他注意事項(xiàng):
①溫度計(jì)無(wú)變化:1.溫度計(jì)損壞,2.電源未打開,3.探針堵塞,4.調(diào)節(jié)閥損壞不進(jìn)氣。
②鍋門打不開:1.壓力過(guò)大,2.調(diào)節(jié)閥損壞,內(nèi)部負(fù)壓。
③管道漏氣:找管道維修。
④滅菌鍋的每周清潔污物及凝結(jié)水同時(shí)清洗;滅菌鍋要保持干凈并無(wú)殘留物(尤其濾器)以防止生銹保-證-大熱傳遞和橡膠用具以蒸沸15min滅菌為宜,高溫高壓處理易失去彈性。
⑤容積控制:采取稱中法測(cè)定蒸發(fā)量,體積100vml稀釋起重量為101vg,高壓夠體積偏差不超過(guò)1%。

1.5培養(yǎng)箱的使用
培養(yǎng)箱的溫度、濕度控制是微生物控制的關(guān)鍵點(diǎn)。使用規(guī)范如下:
①外觀檢查,有無(wú)噪音,是否放平穩(wěn),有無(wú)故障。
②檢查溫度設(shè)置是否為檢測(cè)要求溫度?顯示溫度與設(shè)定溫度是否在允許波動(dòng)范圍內(nèi)。
③為了保持培養(yǎng)箱內(nèi)部濕度,可在培養(yǎng)箱內(nèi)放一個(gè)盛水的小燒杯,防止培養(yǎng)基干燥。
④培養(yǎng)箱內(nèi)物品擺放整齊,但不要過(guò)緊密,防止溫度,空氣等環(huán)境之間的差異對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,并關(guān)好箱門(輕開輕關(guān))。
⑤每天對(duì)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度計(jì)和顯示溫度進(jìn)行比較,填寫儀器設(shè)備使用記錄,對(duì)較大差異的查找原因進(jìn)行處理。
⑥保持好培養(yǎng)箱內(nèi)衛(wèi)生,對(duì)有異味的培養(yǎng)箱進(jìn)行通氣,并每周對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行消du殺菌,培養(yǎng)后的平皿及時(shí)清理,防止霉菌或其他微生物累積。
⑦冰箱每周進(jìn)行除霜清理,存放的物品做好記錄,對(duì)不用的物品及時(shí)清理。


三、樣品接收
2.1送檢樣品的處理
微生物接受樣品,就是檢驗(yàn)工作開始之時(shí),樣品接收、交接環(huán)節(jié)是檢驗(yàn)工作的第1環(huán)節(jié),關(guān)系到檢驗(yàn)工作質(zhì)量和效率。
為了真實(shí)的反應(yīng)車間加工產(chǎn)品的質(zhì)量情況,正確的指導(dǎo)車間生產(chǎn)。具體措施如下:
化驗(yàn)員到車間自取樣品,保-證每個(gè)車間每周1個(gè)樣品,并在化驗(yàn)結(jié)果后備注“自取”。另外有特殊情況可增加取樣量,微生物考核時(shí)按正常樣品計(jì)算,在自取樣品欄里填寫。
2.2樣品運(yùn)輸
個(gè)人車間樣品由自己取,便于與車間交流溝通,掌握產(chǎn)品信息和工藝,對(duì)微生物檢測(cè)判斷有幫助。微生物樣品運(yùn)輸過(guò)程中必須采用保溫袋,防止溫度變化;另外運(yùn)輸過(guò)程中樣品不要落地,防止袋子破損污染樣品。
2.3樣品保存
冷凍品按要求進(jìn)行解凍,干燥食品可放在常溫冷暗處,易腐和冷卻樣品應(yīng)放入10℃環(huán)境。冷凍樣品來(lái)不及檢驗(yàn)應(yīng)放入-15℃以下冰箱內(nèi)。
原則上冷凍樣品取出后,按包裝原樣在室溫下自然解凍;也可在0-4℃環(huán)境解凍,時(shí)間不超過(guò)18小時(shí);也可在溫度不超過(guò)45℃環(huán)境中解凍,時(shí)間不超過(guò)15min。
2.4樣品制備
根據(jù)樣品不同性狀、類型的食品,進(jìn)行適當(dāng)處理,盡可能的保-證均勻取樣;虬凑諜z測(cè)方法進(jìn)行樣品處理。


四、日常工作
1。文件資料及物品的規(guī)定
為了規(guī)范微生物資料管理,起到工作有秩序的目的,防止重要資料丟失。特對(duì)資料整理規(guī)定如下,希望大家嚴(yán)格執(zhí)行,為我們創(chuàng)造一個(gè)良好的工作環(huán)境。
2.個(gè)人桌面
1.原始記錄夾子要有對(duì)應(yīng)車間的標(biāo)簽,沒有的可向組長(zhǎng)索要打印一張,不要出現(xiàn)標(biāo)簽與內(nèi)容不符的現(xiàn)象。
2.個(gè)人資料必須放到夾子里面,不要在桌面出現(xiàn)裝訂紙張。
3.原始記錄、抽取單不要隨意亂放,防止客戶參觀時(shí)隨意翻看,泄漏客戶機(jī)密,記錄完畢后,要整齊放到辦公室夾子座里面。
4. 其它資料包括書籍等要放到小柜里,借閱、歸還時(shí)要到資料管理員簽字,借閱的書籍也不要亂放,看完后要整齊放在辦公室桌子,禁止放到實(shí)驗(yàn)區(qū)(可在實(shí)驗(yàn)區(qū)閱讀)。
5. 有單頁(yè)報(bào)告單或者其他資料時(shí),可放到插頁(yè)夾子里,每組一個(gè),桌面不要出現(xiàn)單頁(yè)紙。

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